| Programa | Título | Grande Área | Área | Bolsa | |
|---|---|---|---|---|---|
| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741744] Análise de associação entre vitiligo e variantes do gene IL21 AGUIAR, Antoniella de; MARTINS, Laysa Toschi; SARTORI, Priscila Uaska; BRANCO., Luiz Felipe Antunes; MIRA, Marcelo Tavora |
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| PIBITI |
PUCPR - Londrina [PA1741381] APERFEIÇOAMENTO DE PROCESSO DE EXTRAÇÃO DE DNA E DETERMINAÇÃO DE SEXO FETAL USANDO PLASMA MATERNO SANTOS, Matheus Peres dos; OLIVEIRA, Carlos Eduardo Coral de |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1742071] ASSOCIAÇÃO DE VARIANTES DOS GENES SLITRK3 E MME E A DOENÇA DE ALZHEIMER FERRARINI, Fernanda Breckenfeld; SIMÃO-SILVA, Daiane P.; SOUZA, Ricardo L. R. de; LORUSSO, Andre Bittencourt |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741671] CORRELAÇÃO MOLECULAR DE VARIANTES GENÉTICAS NO GENE APOB COM FENÓTIPO DA SÍNDROME DE IRLEN CORRÊA, Camila Graczyk; HERAI, Roberto Hirochi |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741984] AÇÃO DO ANTIOXIDANTE ÁCIDO ASCÓRBICO-L (VITAMINA C) NA SOBREVIDA DE ERITRÓCITOS URÊMICOS E SAUDÁVEIS. ALEGRE, Júlia Bacarin Monte; ANDRADE, Gabriela Bohnen; AMARAL, Andrea Novais Moreno |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741985] AÇÃO DO ANTIOXIDANTE ÁCIDO ASCÓRBICO-L (VITAMINA C) NO BALANÇO REDOX DE ERITRÓCITOS URÊMICOS E SAUDÁVEIS. DIAS, Erika Sousa; ANDRADE, Gabriela Bohnen; AMARAL, Andrea Novais Moreno |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741710] Avaliação da Expressão de Toll-Like Receptor 2 (TLR2) em Neutrófilos em Resposta à Uremia LOBO, Julio Cesar Amorim; MORENO, Prof. Andrea; GADOTTI, Ana Carolina |
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| PIBITI |
PUCPR - Londrina [PA1741910] AVALIAÇÃO DA AÇÃO ANTIFÚNGICA DA LACTOFERRINA EM MEMBRANA DE POLIACRILAMIDA EM ESPÉCIES DE CANDIDA MIYAMOTO, Vitor Hugo; LEPRE, Enzo Honório Ruzzon. Gabriel Zanin Garbúggio. Pedro Henrique Cortez. Rafael Perusso; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBITI |
PUCPR - Londrina [PA1741911] AVALIAÇÃO DA AÇÃO ANTIFÚNGICA DA LACTOFERRINA EM MEMBRANA DE POLIACRILAMIDA EM FUNGOS FILAMENTOSOS CORTEZ, Pedro Henrique; RUZZON, Enzo Honório; LEPRE, Rafael Perusso; MIYAMOTO, Vitor Hugo; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBITI |
PUCPR - Londrina [PA1741919] AVALIAÇÃO DA AÇÃO ANTIFÚNGICA DO EXTRATO DA CAMPOMANESIA XANTHOCARPA EM MEMBRANA DE POLIACRILAMIDA PARA DERMATÓFITOS LEPRE, Rafael Perusso; PEZZINI, Ana Paula Galina; RUZZON, Enzo Honório; GARBÚGGIO, Gabriel Zanin; PINTO, Gabriela Regatieri; CAMPOS, Nathalia da Fonseca; CORTEZ, Pedro Henrique; MIYAMOTO, Vitor Hugo; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBITI |
PUCPR - Londrina [PA1741920] AVALIAÇÃO DA AÇÃO ANTIFÚNGICA DO EXTRATO DA CAMPOMANESIA XANTHOCARPA EM MEMBRANAS DE POLIACRILAMIDA EM ESPÉCIES DE FUNGOS LEVEDURIFORMES RUZZON, Enzo Honório; CORTEZ, Pedro Henrique; LEPRE, Rafael Perusso; MIYAMOTO, Vitor Hugo; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBIC |
PUCPR - Londrina [PA1741980] AVALIAÇÃO DA SUSCEPTIBILIDADE E ESTUDO DE GENE DE RESISTÊNCIA ERG11 AO FLUCONAZOL EM CANDIDA ALBICANS GARBÚGGIO, Gabriel Zanin; LEPRE, Rafael Perusso; MIYAMOTO, Vitor Hugo; GASPARINI, Maria Luiza Freitas Barone; RIEPENHOFF, Matheus Jurgen; FREITAS, Amanda Pasquini de; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBIC |
PUCPR - Londrina [PA1741901] AVALIAÇÃO DA SUSCEPTIBILIDADE E ESTUDO DE GENE DE RESISTÊNCIA ERG11 AO FLUCONAZOL EM CANDIDA KRUSEI FEIJÓ, Izadora El Reda; SILVA, Ana Gabriela Bento Correia da; REZENDE, Débora Villas Boas; ZANFRILLI, Isadora da Silva; SPIRONELLI., Lucas Guerreiro; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBIC |
PUCPR - Londrina [PA1741979] AVALIAÇÃO DA SUSCEPTIBILIDADE E ESTUDO DE GENE DE RESISTÊNCIA ERG11 AO FLUCONAZOL EM CANDIDA PARAPSILOSIS. SILVA, Ana Gabriela Bento Correia da; ZANFRILLI, Isadora da Silva; FEIJÓ, Izadora El Reda; ZAGO, Maria Beatriz de Paula; SALOMÃO., Vitória Rodrigues; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBIC |
PUCPR - Londrina [PA1741900] AVALIAÇÃO DA SUSCEPTIBILIDADE E ESTUDO DE GENE DE RESISTÊNCIA ERG11 AO FLUCONAZOL EM CANDIDA TROPICALIS ZANFRILLI, Isadora da Silva; SILVA, Ana Gabriela B. C. da; FEIJÓ, Izadora El R.; BOSCARIOLI, Maria Leticia N.; LIMA, Raissa A. Alves de; ABE, Aline Tancler Stipp |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741884] AVALIAÇÃO DE CARNOBACTERIUM MALTAROMATICUM COMO PROBIÓTICO – ADESÃO E MECANISMO DE AÇÃO CONTRA PATÓGENOS EM CÉLULAS CACO-2 DUARTE, Sofia Cavalim; CAVALARI, Caroline Maria de Andrade; MACEDO, Renata Ernlund Freitas de |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741289] VARIAÇÃO MORFOLÓGICA DO CÁGADO-PESCOÇO-DE-COBRA, HYDROMEDUSA TECTIFERA COPE, 1870, NO ESTADO DO PARANÁ, BRASIL (TESTUDINES:CHELIDAE) SILVA, Eduarda Aparecida Fernandes da; LEITE, Julio Cesar de Moura |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1741851] ANÁLISE DA EXPRESSÃO DE KI-67, P53, TCTP E PARQUINA EM AMOSTRAS DE GLIOMAS PEDIÁTRICOS. CARMO, Leticia Arianne Panini do; MALAQUIAS, Prof. Dr. Mineia A. S.; CASTRO, Dr. Eduardo de; NORONHA, Lucia de |
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| PIBIC Jr |
PUCPR - Curitiba [PA1742227] ANÁLISE DA PROTEÍNA OCLUDINA NA BARREIRA HEMATOENCEFÁLICA DE NEONATOS COM MICROCEFALIA MARINI, Emily Scaranello; NORONHA, Lucia de; PESSERL, Maria Helena; MALAQUIAS, Mineia Alessandra Scaranello |
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| PIBIC |
PUCPR - Curitiba [PA1742226] ANÁLISE DAS PROTEÍNAS CLAUDINAS 1, 3 E 5 NA BARREIRA HEMATOENCEFÁLICA DE NEONATOS COM MALFORMAÇÃO CEREBRAL ZENI, Rafaela Chiuco; NORONHA, Supervisão da Dra. Lucia de; NAGASHIMA, Seigo; PAULA, Caroline Busatta Vaz de; MARTINS, Ana Paula Camargo; NETO, Plínio Cézar; CARMO, Leticia Arianne Panini do; MARINI, Emily Scaranello; MALAQUIAS, Mineia Alessandra Scaranello |
Ciências da Saúde | Anatomia Patológica e Patologia Clínica | ICV | Ver mais |
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| Autor(es) | AGUIAR, Antoniella de1; MARTINS, Laysa Toschi3; SARTORI, Priscila Uaska3; BRANCO., Luiz Felipe Antunes3; MIRA, Marcelo Tavora2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: O vitiligo é uma doença caracterizada por máculas de despigmentação na pele causadas pela perda progressiva de melanócitos, de etiologia ainda não totalmente elucidada. Existem diversa hipóteses para explicar a origem da doença, sendo a teoria autoimune a mais aceita. Dentre as evidencias que suportam essa teoria está o bom resultado observado para tratamento com corticoides e imunossupressores, a presença de anticorpos e de linfócitos CD4+ e CD8+ nas áreas de lesão, além da alta frequência de comorbidades autoimunes em pacientes com vitiligo. Neste contexto, um dos genes de interesse é o gene IL21 associado a várias doenças autoimunes e codificador da interleucina 21, que possui vários efeitos nas respostas imunológicas humorais e celulares. Entretanto, não existem estudos investigando potencial associação entre variantes do IL21 e fenótipos do vitiligo.
Objetivo: Testar para associação entre o vitiligo e os marcadores genéticos rs2055979, rs907715 e rs4833837 localizados no gene IL21.
Materiais e método: A amostra populacional estudada é composta por 596 indivíduos distribuídos em 188 famílias nucleares, e foi recrutada entre 2004 e 2007 no ambulatório da Santa Casa de Misericórdia de Curitiba e em um consultório particular de dermatologia. O DNA dos participantes foi extraído pelo método de salting out e a genotipagem realizada por discriminação alélica baseada em fluorescência. Análises de associação foram realizadas através do Teste de Desequilíbrio de Transmissão (TDT) implementado no programa FBAT. A verificação do equilíbrio de Hardy-Weinberg e análise de desequilíbrio de ligação foram feitas utilizando-se o programa Haploview.
Resultados: Os 3 marcadores testados obtiveram uma porcentagem de genotipagem superior a 85% e não desviaram do equilíbrio de Hardy-Weinberg. Para os modelos genéticos testados, não foi identificado associação entre as variantes estudadas com o vitiligo per se. Na análise estratificada por covariáveis não-genéticas, foi encontrada associação para os marcadores rs4833837 e rs907715, com significância estatística limítrofe, potencialmente devido ao número baixo de famílias informativas, portanto, baixo poder estatístico.
Considerações finais: Os polimorfismos rs2055979, rs4833837 e rs907715 localizados no gene IL21 não foram encontrados associados ao vitiligo na população estudada; este resultado negativo sugere a exclusão do gene IL21 como candidato ao controle da suscetibilidade ao vitiligo, contribuindo para um maior entendimento da fisiopatogênese molecular da doença.
Palavras chave: Autoimunidade. IL21. Vitiligo. Genética.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | SANTOS, Matheus Peres dos1; OLIVEIRA, Carlos Eduardo Coral de2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Introdução: O DNA livre de células no plasma sanguíneo pode auxiliar no diagnóstico pré-natal de condições genéticas, oferecendo possibilidades de diagnóstico, prognóstico e monitoramento de doenças, e na determinação de sexo fetal. De fato, sequências do cromossomo Y podem ser amplificadas e detectadas no plasma materno em gestações de fetos do sexo masculino. Há uma grande variação nas concentrações de DNA livre de células no plasma dependendo de condições fisiopatológicas, e das técnicas empregadas para a extração do material genético.
Objetivo: Objetivos: Neste trabalho foi testada e modificada uma técnica simples e de baixo custo para extração de DNA livre no plasma, e proposta uma metodologia de amplificação do cromossomo Y para detecção de sexo a partir da análise de DNA plasmático.
Materiais e método: Materiais e Método: Avaliamos uma técnica de extração de DNA plasmático a partir de 2, 3 e 5mL de um pool de plasma. Em seguida, o material foi submetido à amplificação por PCR-nested da sequência DYS14 do cromossomo Y do DNA extraído e de um DNA controle. Os produtos das reações de PCR foram analisados por eletroforese em gel de acrilamida 10% corado com nitrato de prata.
Resultados: Resultados: A extração de DNA foi eficaz para obter baixas concentrações de DNA do pool de plasma, a partir de modificações do protocolo original. O rendimento da extração foi nulo em volume de 2mL, mas foi suficiente em amostras de 3 e 5mL do pool de plasma. A quantidade de DNA nessas amostras embora muito baixa, foi suficiente para servir como molde para a PCR. O cromossomo Y foi amplificado na amostra de DNA proveniente do pool de plasma, bem como no DNA controle.
Considerações finais: Considerações Finais: O protocolo de extração testado foi adequado para obter quantidade suficiente de DNA livre em um pool de plasma, sendo que o rendimento é melhor em maiores volumes de amostra. A padronização da extração de DNA livre no plasma e da amplificação do cromossomo Y pode ter uma promissora aplicabilidade na identificação de sexo fetal no início da gravidez, um resultado que será avaliado com mais detalhes em estudos futuros.
Palavras chave: Extração de DNA. DNA livre no plasma. Metodologia.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | FERRARINI, Fernanda Breckenfeld1; SIMÃO-SILVA, Daiane P.3; SOUZA, Ricardo L. R. de3; LORUSSO, Andre Bittencourt2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: A doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurodegenerativa e a causa mais comum de demência, que apresenta cerca de 10 milhões de novos casos no mundo a cada ano. É caracterizada por declínio na memória, comunicação, resolução de problemas e outras habilidades cognitivas. Embora multifatorial, visando elucidar os fatores genéticos envolvidos na doença, há controvérsias sobre a associação do gene BCHE tendo em vista a possível influência da ação de genes próximos, como o MME e o SLITRK3.
Objetivo: Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar, por meio de um estudo caso-controle, a associação entre os polimorfismos rs1126680 e rs1803274 do gene BCHE; rs13086740 e rs2016846, do gene MME; rs17449213 e rs3828419, do gene SLITRK3 e variante Apoε4 do gene APOE, identificando também a presença de desequilíbrio de ligação (DL) entre as variantes.
Materiais e método: A amostra populacional foi proveniente do Ambulatório de Disfunção Cognitiva do Hospital de Clínicas (Universidade Federal do Paraná) e do Ambulatório de Desordens de Memória do Comportamento, do Instituto de Neurologia de Curitiba. O DNA dos pacientes foi extraído pelo método salting out e a genotipagem realizada com kits TaqMan SNP Genotyping Assays, por discriminação alélica baseada em fluorescência. As frequências alélicas e genotípicas foram determinadas por contagem direta, o teste de desequilíbrio de ligação, equilíbrio de Hardy-Weinberg (HW), teste de qui-quadrado (x²) e valor p foram realizados utilizando-se o software Haploview 4.2. Para todos os testes adotou-se um valor de significância de 5%.
Resultados: As variantes dos genes MME e SLITRK3 não demonstraram associação direta com DA, não excluindo a possibilidade de associação de outras variantes dos mesmos genes. As variantes analisadas apresentaram equilíbrio de Hardy-Weinberg e, observou-se DL entre os marcadores do gene BCHE.
Considerações finais: O estudo permitiu obter maiores informações sobre o padrão genético da doença de Alzheimer e presumir a avaliação de outros genes candidatos à associação com a doença, bem como a outras variantes dos mesmos genes, indicando a importância dos estudos de associação realizados a partir da avaliação de SNPs
Palavras chave: Demência. BCHE. Genotipagem. SNP.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | CORRÊA, Camila Graczyk1; HERAI, Roberto Hirochi2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: A Síndrome de Meares-Irlen, ou Síndrome de Irlen (SI), embora ainda controversa, é uma condição caracterizada por sintomas de estresse visual (astenopia) e distorções perceptivas visuais, que já foram associados com anomalias no perfil lipídico. Um possível marcador genético é o gene APOB, que está relacionado com o metabolismo anormal de lipídeos.
Objetivo: Realizar um estudo de correlação de vias metabólicas e moleculares do gene APOB com fenótipos de falha no processamento visual descrito na SI.
Materiais e método: Dados foram analisados utilizando a ferramenta Reactome para detecção das vias metabólicas relacionadas ao gene APOB e para detecção de outras proteínas que interagem com tal gene. As proteínas que possuem relação com esse gene foram analisadas quanto a sua influência em vias metabólicas de fototransdução visual que causam sintomas relacionados aos fenótipos da Síndrome de Irlen. Tal análise foi realizada por meio de artigos que denotassem experimentos práticos.
Resultados: Foram encontradas 6 proteínas ou interações proteicas que possuem relação com o APOB e com fenótipos visuais. Dentre esses achados, as moléculas APOB, LDLR e APOE, além da relação APOB-LDLR podem justificar sintomas relacionados com a SI relacionados com alterações no epitélio pigmentar da retina e com a membrana de Bruch. Os sintomas apontados dizem respeito a distorções no segmento posterior, causando problemas de adaptação de contraste, entre claro e escuro.
Considerações finais: A Síndrome de Irlen em si precisa ser melhor analisada quanto aos seus métodos diagnósticos e eficácia de tratamento antes de ter sua fisiopatologia e possíveis bases genéticas determinadas. Quanto aos genes do estudo, são necessários mais estudos, de caráter experimental básico e pré-clínicos, para definir o exato papel das moléculas em sintomas relacionados com falhas no processamento visual que podem ser relacionados a fenótipos como o da dislexia, com evidências que os genes da pesquisa possam causar as dificuldades em adaptação ao contraste. São também necessários estudos que tratem da função da via magnocelular em células como cones e o papel de retinoides nesse metabolismo.
Palavras chave: gene APOB. processamento visual. dislexia. vias metabólicas. síndrome de Irlen.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | ALEGRE, Júlia Bacarin Monte1; ANDRADE, Gabriela Bohnen3; AMARAL, Andrea Novais Moreno2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Pacientes em fase terminal da doença renal crônica (DRC) sofrem de anemia, fenômeno causado pela produção do hormônio eritropoietina renal comprometida e pela deficiência da absorção de ferro, diminuindo a eritropoiese. Ademais, sugere-se que a anemia possa estar relacionada ao aumento da eriptose, a morte celular dos eritrócitos a partir do desequilíbrio do meio intracelular e da exposição da camada de fosfatidilserina (FS). Por isso, considera-se que uma abordagem terapêutica na tentativa de manter a integridade dos eritrócitos, mesmo em ambiente urêmico, seja um passo importante para o bem-estar dos pacientes.
Objetivo: O presente estudo teve como objetivo avaliar a ação do antioxidante ácido ascórbico (vitamina C), na eriptose de eritrócitos urêmicos e saudáveis in vitro.
Materiais e método: Os eritrócitos foram obtidos de sangue periférico de pacientes em HD (n=6) urêmicos em tubos citrato de sódio e tubos SST para armazenamento do soro. Após centrifugação do sangue em 3000 rpm, 15 min e à 4°C. Os eritrócitos isolados foram incubados por 1h na presença de Ácido Ascórbico-L (AA) 20 mM ou 200 mM ou ainda somente com solução TRIS-BSA 4%. Após a incubação, adicionou-se aos poços soro proveniente de indivíduos saudáveis (S-CON) (1:10) ou soro de pacientes em hemodiálise (S-HD) (1:10), seguido por 23h de incubação. Posteriormente finalização de todas as incubações, as células foram marcadas com Fluo-3/AM para dosagem de cálcio intracelular. Por fim, utilizou a citometria de fluxo para as análises de todas as leituras e as estatísticas foram feitas através do programa SPSS, considerando valores significativos de p<0,05.
Resultados: A partir da fluorescência de Fluo-3/AM, conclui-se que os eritrócitos incubados com o soro urêmico (S-HD) possuíram uma quantidade superior de cálcio intracelular quando comparados aos eritrócitos incubados com soro de indivíduos saudáveis (S-CON). Além disso, as duas concentrações de ácido ascórbico (AA) obtiveram efeito na diminuição da entrada de cálcio nas incubações com o S-CON ou S-HD, se comparado aos seus controles.
Considerações finais: Os resultados do presente trabalho demostraram que o ácido ascórbico é eficaz na diminuição da entrada de cálcio no meio intracelular de eritrócitos urêmicos. Portanto, conclui-se que o ácido ascórbico é uma possível ferramenta de efeitos benéficos para várias doenças que geram a anemia na DRC.
Palavras chave: DRC. Anemia. Eriptose. Ácido Ascórbico (AA).
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | DIAS, Erika Sousa1; ANDRADE, Gabriela Bohnen3; AMARAL, Andrea Novais Moreno2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: : A Doença renal crônica (DRC) é caracterizada pela perda da função renal irreversível que perdure por mais de três meses. Na progressão da doença, a anemia aparece como uma complicação comum nos estágios mais severos. Por outro lado, o estresse oxidativo está aumentado na DRC com diminuição da fração do antioxidante glutationa reduzida (GSH), consequentemente ocorre falha na neutralização das ERO. Nos eritrócitos (RBC) este aumento do estresse oxidativo induz eriptose, aumentando a depuração dessas células e, portanto, tendo participação na anemia renal. Além disso, há perda de antioxidantes durante a dialise nesses pacientes, o que pode agravar o estresse oxidativo e consequentemente induzir eriptose, contribuindo para a anemia. Então, o uso de antioxidante pode auxiliar a amenizar os danos oxidativos nestes pacientes que realizam a dialise.
Objetivo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do antioxidante ácido ascórbico no balanço redox de eritrócitos urêmicos e saudáveis in vitro.
Materiais e método: Foram coletados eritrócitos de pacientes em hemodiálise, em seguida foi realizada a lavagem e a centrifugação das células e após esse procedimento, as células foram incubadas por 1h nas condições: RPMI 4%BSA (controle negativo), ácido ascórbico 20mM ou 200mM. Após incubação, foi adicionado nas placas o soro de indivíduos saudáveis (S-CON), soro autólogo (S-HD) ou peróxido de oxigênio (H2O2), mantendo incubação por 23h. As células foram então marcadas com DCFH-DA ou ThiolTracker. As leituras foram realizadas por citometria de fluxo.
Resultados: O antioxidante ácido ascórbico demonstrou efeito benéfico na sobrevida do eritrócito, pois demonstrou a capacidade de diminuir a produção das EROs e de aumentar o GSH mesmo em ambiente urêmico (S-HD), diminuindo desta forma os danos oxidativos.
Considerações finais: O ácido ascórbico (Vitamina C) em ambas as concentrações utilizadas (AA20Mm ou AA200Mm) demonstrou ter uma ação protetora nos eritrócitos urêmicos em relação ao estresse oxidativo.
Palavras chave: Antioxidante. Doença renal Crônica. Ácido ascórbico. Estresse Oxidativo
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | LOBO, Julio Cesar Amorim1; MORENO, Prof. Andrea3; GADOTTI, Ana Carolina2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: A Doença Renal Crônica (DRC), caracterizada pela perda progressiva e irreversível da estrutura ou função renal, compromete a remoção de metabólitos levando ao acúmulo de resíduos no sangue podendo acarretar em problemas na saúde do indivíduo. Apesar da ampla disponibilidade de terapias de substituição renal, a mortalidade dos pacientes em estágio final da DRC permanece alta. Infecções bacterianas e sepse correspondem à 20% das mortes, sendo a segunda causa mais comum entre pacientes em hemodiálise (HD). A alta frequência da incidência de infecções bacterianas nesses pacientes sugere que alterações existentes no reconhecimento patogênico por células da primeira linha de defesa imune, como os neutrófilos, podem estar envolvidos nesse quadro.
Objetivo: Explorar a influência da uremia na expressão do receptor do tipo Toll 2 (TLR2) em neutrófilos de pacientes em hemodiálise.
Materiais e método: Como ensaio piloto e análise de baseline dos marcadores de superfície de reconhecimento antigênico e marcadores de ativação, foi coletado o sangue de 8 indivíduos saudáveis (CON-Neu), 6 pacientes antes (Pre-HD-Neu) e 2 pacientes após (Pos-HD-Neu) a sessão de hemodiálise, em seguida centrifugado e os neutrófilos isolados por gradiente de concentração com o meio de separação Histopaque. Então, as células foram incubadas com anticorpo anti-CD282 e sonda DCFH-DA para determinação de fluorescência por citometria de fluxo.
Resultados: Foi possível observar no grupo HD uma menor expressão de TLR2, tanto no Pre-HD-Neu (32.1±9), quanto no Pos-HD-Neu (37.5±2.1) e maior quantidade de Espécies Reativas de Oxigênio (ERO) em ambos os momentos quando comparados com CON-Neu.
Considerações finais: Nossos resultados indicam diferença na expressão de baseline quanto aos marcadores de reconhecimento e ativação, estando a expressão de TLR2 em Pre-HD-Neu reduzida quando comparado ao baseline de CON-Neu. Juntamente, o aumento na quantidade de ERO indica aumento do estresse oxidativo nas células HD-Neu comparado às CON-Neu. Assim, esta primeira análise indica que a disfunção imune em relação a ação dos neutrófilos, pode estar relacionada principalmente com o reconhecimento inicial de patógenos.
Palavras chave: Doença renal crônica; uremia; disfunção imune; neutrófilos.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | MIYAMOTO, Vitor Hugo1; LEPRE, Enzo Honório Ruzzon. Gabriel Zanin Garbúggio. Pedro Henrique Cortez. Rafael Perusso3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: A candidíase é uma infecção hospitalar cada vez mais importante em adultos e crianças, principalmente naqueles atendidos em unidades de terapia intensiva (UTI). Embora a Candida albicans seja a causa mais comum de candidemia, houve um aumento no isolamento de espécies não-albicans de Candida nos últimos anos (KAUFFMAN,2020) . Diversos podem ser os tratamentos para essas infecções, a mais comumente utilizada em hospitais são os antifúngicos, porém, por mais eficaz que seja essa classe de medicamentos, em alguns casos nota-se a necessidade de outros meios terapêuticos. A lactoferrina, proteína globular isolada, inicialmente, a partir do leite bovino, possui funções terapêuticas conhecidas como bactericida e fungicida.
Objetivo: A partir disso, esse estudo tem como proposta, analisar a ação antifúngica da lactoferrina para o tratamento de infecções causadas pelos fungos pertencentes ao gênero Candida
Materiais e método: METAs leveduras de Candida foram preparadas em Agar Sabouraud dextrose em glicerol 20% a -20ºC. Em relação ao preparo da lactoferrina, foi feita solução de com 250mg de lactoferrina por 100ml de água destilada estéril A solução foi deixada em estufa a 37ºC por 1 hora e homogeneizada a cada 30 minutos. Após este período, a solução foi filtrada em Syringe Filter 13 mm (Polyester screen 17 µm) e armazenada em ambiente refrigerado até o momento de seu uso. As membranas foram confeccionadas em poliacrilamida em placa de petri estéril. Foram misturados 6,5 mL do extrato de solução de lactoferrina em 2,5 mL de Acriamida Tris, 1,0 mL de TBE (10X), 55µL e persulfato de amônia e 5µL de TEMED. O gel foi solidificao em fluxo laminar, afim de evitar possíveis contaminações e armazenado em ambiente refrigerado até o momento do uso. O inóculo foi preparado a partir de um cultivo em Sabouraud dextrose por 24 horas a 37ºC. Em seguida, uma alíquota de células foi subcultivada em meio RPMI suplementado com 2% de glicose por 24 horas a 37ºC. Posteriormente, com o auxílio da câmara de Neubauer foi realizado o ajuste de concentração celular em 1x107 cel/mL em meio RPMI.
Resultados: Após a coleta de resultados, foi feita a analise em comparativo com os grupos controle, o que demonstrou efeito negativo no desenvolvimento do biofilme de algumas das espécies do gênero Candida
Considerações finais: Em relação a esses resultados promissores, novos estudos envolvendo a lactoferrina como agente terapêutico para essas infecções são necessários, para então ser utilizado em condições hospitalares e ambulatoriais.
Palavras chave: Candida. lactoferrina. ação antifúngica. biomembrana
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | CORTEZ, Pedro Henrique1; RUZZON, Enzo Honório3; LEPRE, Rafael Perusso3; MIYAMOTO, Vitor Hugo3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: No ambiente há diversos gêneros de fungos filamentosos, que podem ser patogênicos, gerando infecções fúngicas cutâneas, ou sistêmicas, sendo estas últimas de difícil diagnóstico e relacionadas à alta morbidade e mortalidade. Tendo isso em vista, vários estudos ao redor do uso de biomembranas para fins terapêuticos já vem sendo demonstrados pela literatura como fonte de bons resultados por características como acelerar o processo de cicatrização, reconstruir a barreira epitelial e, em conjunto com outras substâncias, prevenir ou reduzir infecções locais.
Objetivo: O presente estudo tem como objetivo, avaliar a ação antifúngica da Lactoferrina em em fungos dermatófitos filamentosos dos gêneros Trichophyton, Microsporum, Penicillium e Aspergillus.
Materiais e método: As amostras foram obtidas da micoteca da Universidade Estadual de Londrina, a partir de resíduos do Laboratório Clínico de um Hospital terciário da Cidade de Londrina. A solução do potencial agente antifúngico foi preparada com 250mg de lactoferrina por 100 mL de água destilada estéril e deixada em estufa a 37ºC por 1 hora, homogeneizando a cada 30 minutos, após este período, a solução foi filtrada em Syringe Filter 13 mm (Polyester screen 17 µm) e armazenada em ambiente refrigerado até o momento de seu uso. A confecção das membranas foram realizadas em poliacrilamida em placa de petri estéril. As placas de 96 poços foram feitas com a concentração padrão de lactoferrina, previamente obtida através de teste de microdiluição, e discos de 0,5mm da membrana com 200µL do inóculo. A placa foi incubada por 48 horas a 37ºC, realizando assim a primeira leitura, e reincubada por mais 48 horas, para a leitura final. Após o disco foi retirado e semeado em sabouraud dextrose para verificar o crescimento em 48 horas.
Resultados: O experimento foi realizado em duplicata, tendo assim o resultado da ação antifúngica total da lactoferrina através do emprego da membrana nos fungos Trichophyton e Penicillium. Em contrapartida, no caso das amostras com cepas do Microsporum sp. e do Aspergillus, houve crescimento fúngico evidenciado. A lactoferrina tem sido, em crescente no decorrer dos anos, associada à estudos terapêuticos devido à sua ação antifúngica, que engloba os fungos utilizados como objetos deste estudo.
Considerações finais: A ação antifúngica da lactoferrina nos gêneros envolvidos no estudo, cujo efeito fungicida se mostrou diferente de acordo com a amostra do gênero e concentração do agente e, por conseguinte, corroborou com a necessidade de novos estudos, não só afim de testar a ação de diferentes concentrações da lactoferrina, como de viabilizar pesquisas em ensaios clínicos em pacientes portadores das patologias relacionadas as espécies fúngicas em questão.
Palavras chave: Lactoferrina. Fungos Filamentosos. Ação Antifúngica.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | LEPRE, Rafael Perusso1; PEZZINI, Ana Paula Galina3; RUZZON, Enzo Honório3; GARBÚGGIO, Gabriel Zanin3; PINTO, Gabriela Regatieri3; CAMPOS, Nathalia da Fonseca3; CORTEZ, Pedro Henrique3; MIYAMOTO, Vitor Hugo3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: O Brasil apresenta uma flora rica e diversa, com importante potencial tecnológico em diversas áreas de estudo. A Campomanesia xanthocarpa, conhecida como gabiroba, é uma planta utilizada de forma medicinal e alimentícia. No ambiente há diversos gêneros de fungos filamentosos, que podem ser patogênicos, gerando infecções fúngicas cutâneas ou sistêmicas, sendo estas últimas de difícil diagnóstico e relacionadas à alta morbidade e mortalidade. O uso de biomembranas para fins terapêuticos já vem sendo demonstrado pela literatura como fonte de bons resultados. Esses biomateriais têm as características de acelerar o processo de cicatrização, reconstruir a barreira epitelial e, em conjunto com outras substâncias, prevenir ou reduzir infecções locais.
Objetivo: Analisar a ação antifúngica do extrato de Campomanesia xanthocarpa, a gabiroba, em quatro gêneros de fungos patogênicos - Trichophyton, Microsporum, Penicillium e Aspergillus.
Materiais e método: O extrato foi preparado e obtido a partir de folhas secas e trituradas da planta (Campomanesia xanthocarpa), em duas concentrações distintas, 1 (um) grama e 2 (dois) gramas, colocados em 100mL de água destilada em ebulição, em temperatura de 37ºC, durante 1 hora. A mistura foi filtrada em Syringe Filter 13mm (Polyester screen 17µm) e armazenada sob resfriamento. A preparação das membranas ocorreu em
poliacrilamida em placa de Petri, em mistura com o extrato obtido, Acrilamida Tris, TBE (10x), persulfato de amônia e TEMED, com solidificação do gel em fluxo laminar. O inóculo foi preparado por cultivo em Sabouraud dextrose ágar por 48 horas, com ajuste de concentração celular, através da câmara de Neubauer, para 1x107 células/mL em meio RPMI. Então foram feitas as análises.
Resultados: As leituras e resultados demonstraram efeito fungicida diferentes, porém positivos, de acordo com a amostra do gênero de fungo e a concentração do extrato de Campomanesia xanthocarpa utilizado.
Considerações finais: Novos estudos são importantes para esclarecer certos fatores como a ação e os níveis adequados do extrato e, assim, estabelecer os próximos passos para a utilização da gabiroba como agente fungicida em ambiente clínico.
Palavras chave: Campomanesia xanthocarpa. gabiroba. fungos filamentosos. ação antifúngica
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | RUZZON, Enzo Honório1; CORTEZ, Pedro Henrique3; LEPRE, Rafael Perusso3; MIYAMOTO, Vitor Hugo3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: A quantidade de antifúngicos disponíveis para combater as diferentes espécies de Candidas pode apresentar um problema caso as leveduras adquiram resistência. Nesse sentido, estudos para testar o potencial de plantas da flora brasileira na inibição desses microrganismos tornam-se de fundamental importância. As folhas da árvore Campomanesia xanthocarpa apresentam essa capacidade, e descobrir meios de difundir o extrato desse composto utilizando biomembranas pode ser de relevante utilidade clínica, uma vez que os polímeros que constituem essas membranas tem a capacidade de transportarem e liberarem de forma controlada drogas de moléculas pequenas, proteínas e outras macromoléculas.
Objetivo: Descobrir se o extrato das folhas da Campomanesia xanthocarpa associado a uma membrana de poliacrilamida é capaz de ser difundido e inibir o crescimento dos fungos das espécies de Candida.
Materiais e método: Foram coletadas e trituradas folhas da árvore gabiroba para preparação do extrato. Após agitação em 100ml de água em ebulição e passado uma hora em estufa a 37ºC, o extrato foi filtrado para ser acrescentado na membrana de poli-2-propenamida, a qual foi formada por unidades de acrilamida. Dois tipos de membranas foram encubadas, as com 10 mg/mL do extrato e 20 mg/mL, com o inócuo das cepas dos fungos das espécies C. parapsilosis, C. albicans, C. tropicalis e C. krusei em Sabouraud dextrose para avaliar o crescimento dos microrganismos.
Resultados: A poliacrilamida foi capaz de difundir o extrato em ambas as concentrações utilizadas. Entretanto, a capacidade de inibição do crescimento das colônias foi visualizada em maior quantidade de amostras nos testes que continham a maior concentração do extrato, apresentando crescimento apenas nas colônias de C. tropicalis. Nos testes em que a membrana possuía concentração menor do extrato houve crescimento da colônia em 54% das amostras analisadas.
Considerações finais: A utilização da gabiroba como planta medicinal demonstrou, nesse estudo e no de outros autores, com um promissor potencial antifúngico. As aplicações do seu extrato utilizando biomateriais para sua difusão abrem perspectivas no tratamento de infecções por leveduras, principalmente quando se pretende ter uma aplicação localizada do extrato e aproveitar das capacidades das biomembranas, como curativa no processo de cicatrização de feridas, na reconstrução da função de barreira do epitélio, e a aceleração da cicatrização de feridas.
Palavras chave: Candida. Campomanesia xanthocarpa. Poli-2-propenamida. Biomembrana.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | GARBÚGGIO, Gabriel Zanin1; LEPRE, Rafael Perusso3; MIYAMOTO, Vitor Hugo3; GASPARINI, Maria Luiza Freitas Barone3; RIEPENHOFF, Matheus Jurgen3; FREITAS, Amanda Pasquini de3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Mais de 90% dos casos de infecções invasivas são causadas por Candida albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis e C. krusei. Para tratamento são indicados antifúngicos, especialmente o Fluconazol, e a terapia com sucesso depende da sensibilidade do microrganismo ao fármaco, porém, as Candida spp apresentam-se cada vez mais resistentes aos antimicrobianos. O principal mecanismo de resistência de Candida spp engloba alterações envolvendo o Gene ERG11.
Objetivo: Verificar o perfil de suscetibilidade frente ao antifúngico fluconazol em isolados clínicos de Candida albicans e avaliar a presença de mutação e do gene ERG11.
Materiais e método: Este estudo conta com isolados de microrganismos obtidos de resíduos de um laboratório clínico de um Hospital terciário da cidade de Londrina. O inóculo foi preparado a partir de um cultivo em Sabouraud dextrose por 48 horas a 37ºC. Posteriormente, uma alíquota de células foi subcultivadas em meio RPMI suplementado com 2% de glicose por 24 horas a 37ºC e, com o auxílio da câmara de Neubauer foi realizado o ajuste de concentração celular em 1x107 cel/mL em meio RPMI. Em seguida, foram realizados testes de sensibilidade dos isolados ao fluconazol o que permitiu determinar a Concentração Inibitória Mínima (CMI). Subsequentemente foi realizada a extração de DNA seguida da obtenção dos genes ERG11, o qual foi amplificado por PCR utilizando primers.
Resultados: Baseado na CIM de fluconazol, podemos afirmar que 5 isolados de Candida albicans, foram consideradas resistentes, apresentando CIM de 64µg/mL, e dois isolados sensível dose dependente com CIM de 32 µg/mL. Demonstrando a baixa afinidade entre o antifúngico e o substrato independentemente da presença de mutação do gene ERG11. Além disso, podemos observar que apenas uma amostra de Candida albicans, apresentou mutação do gene ERG11, com CIM de 64µg/mL, apresentando assim relação da resistência à presença de mutação do gene ERG11.
Considerações finais: Foi possível observar que a resistência ao fluconazol não está ligada apenas à presença de mutação ao gene ERG11, devendo apresentar outros mecanismos de resistência, como ativação de bomba de efluxo, tendo a necessidade de mais estudos relacionados a resistência de Candida albicans ao fluconazol.
Palavras chave: Candida albicansi. Candidemia. Fluconazol. Resistência
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | FEIJÓ, Izadora El Reda1; SILVA, Ana Gabriela Bento Correia da3; REZENDE, Débora Villas Boas3; ZANFRILLI, Isadora da Silva3; SPIRONELLI., Lucas Guerreiro3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: A infecção por Candida spp é conhecida como Candidíase, a qual apresenta como principais agentes etiológicos: C. albicans (mais comum), C.parapsilosis, C. tropicalis, C. krusei, entre outros. As candidemias apresentam elevada morbimortalidade e casos crescentes, e geralmente afetam pele e mucosas. Para tratamento são indicados antifúngicos, especialmente o Fluconazol, e a terapia com sucesso depende da sensibilidade do microorganismo ao fármaco, porém, as Candidas spp apresentam-se cada vez mais resistentes aos antimicrobianos. O principal mecanismo de resistência da Candida spp engloba alterações envolvendo o Gene ERG11
Objetivo: Verificar o perfil de suscetibilidade frente ao antifúngico fluconazol em isolados clínicos de Candida krusei e avaliar a presença de mutação e do gene ERG11.
Materiais e método: Este estudo conta com isolados de microorganismos obtidos de resíduos de um laboratório clínico de um Hospital terciário da cidade de Londrina. O inóculo foi preparado a partir de um cultivo em Sabouraud dextrose por 48 horas a 37ºC. Posteriormente, uma alíquota de células foi subcultivadas em meio RPMI suplementado com 2% de glicose por 24 horas a 37ºC e, com o auxílio da câmara de Neubauer foi realizado o ajuste de concentração celular em 1x107 cel/mL em meio RPMI. Em seguida, foram realizados testes de sensibilidade dos isolados ao fluconazol o que permitiu determinar a Concentração Inibitória Mínima (CMI). Subsequentemente foi realizada a extração de DNA seguida da obtenção dos genes ERG11, o qual foi amplificado por PCR utilizando primers. Para cada amostra analisada, toda a sequência de leitura do gene ERG11 foi comparada com uma sequência ERG11 previamente descrita (número de acesso X13296) obtida de uma espécie sensível a fluconazol.
Resultados: Baseado na CMI podemos afirmar que a Candida krusei, em todas as amostras, foi considerada resistente ao medicamento em questão. Essa espécie é intrinsicamente resistente ao fluconazol, uma vez que a afinidade entre o antifúngico e o substrato encontra-se reduzida independentemente da presença de mutação do gene ERG11. Além disso, pudemos observar que uma das amostras da Candida krusei, na presença de mutação do gene ERG11, apresentou sensibilidade dose dependente.
Considerações finais: Conclui-se que, a espécie em questão pode ser considerada resistente ao Fluconazol através de dois mecanismos, intrínseco e extrínseco, e que não há necessidade de exposição prévia ao Fluconazol para o desenvolvimento deste fenômeno.
Palavras chave: Candida krusei. Candidemia. Fluconazol. Resistência
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | SILVA, Ana Gabriela Bento Correia da1; ZANFRILLI, Isadora da Silva3; FEIJÓ, Izadora El Reda3; ZAGO, Maria Beatriz de Paula3; SALOMÃO., Vitória Rodrigues3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Candida é um fungo muito conhecido por causar uma infecção chamada Candidíase. Suas principais espécies são C. albicans, seguida por C. tropicalis, C. parapsilosis e C. kruzei. É importante identificar sua espécie em casos de infecção, pois cada uma delas apresenta diferentes perfis de sensibilidade aos antifúngicos. As drogas mais usadas para tratamento de infecções fúngicas são a anfotericina B e os triazólicos, como o fluconazol. A resistência aos azóis em meio às espécies de Candida tem aumentado e a alteração do gene ERG11 tem se mostrado um forte mecanismo de resistência.
Objetivo: Verificar o perfil de susceptibilidade frente ao antifúngico fluconazol de isolados de Candida parapsilosis e avaliar a presença de mutação e do gene ERG11.
Materiais e método: O estudo contou com isolados de microrganismos advindos de resíduos de culturas positivas que seriam rejeitos de um laboratório clínico de um hospital terciário da cidade de Londrina. As amostras foram preparadas a partir de um cultivo em Sabouraud dextrose por 48 horas, depois uma alíquota de células foi subclivada e posteriormente feito um ajuste de concentração celular em meio RPMI. Foram feitos testes de sensibilidade ao fluconazol em todos os isolados para a determinação da MIC (Concentração Inibitória Mínima). A extração de DNA foi realizada por meio de lise alcalina. O gene ERG11, obtido a partir do DNA, foi amplificado por PCR utilizando primers. O tamanho de cada produto do PCR foi analisado por eletroforese em gel de agarose 1% a 110V e visualizado sob foco ultravioleta. A sequência de leitura do gene ERG11 de cada amostra foi comparada com uma sequência do mesmo gene previamente descrita de uma espécie sensível ao fluconazol.
Resultados: Das sete amostras isoladas de Candida parapsilosis, seis mostraram-se sensíveis dose dependente e uma resistente. Dentro das sensíveis dose dependente, duas apresentaram mutação do gene ERG11 com MIC 32 µg/mL. O isolado com maior MIC de fluconazol não mostrou alteração no gene em análise.
Considerações finais: Foi possível encontrar o gene ERG11 mutado e verificar sua influência sobre a resistência da Candida parapsilosis ao fluconazol.
Palavras chave: Candida; ERG11; Mutação; Resistência; Fluconazol.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | ZANFRILLI, Isadora da Silva1; SILVA, Ana Gabriela B. C. da3; FEIJÓ, Izadora El R.3; BOSCARIOLI, Maria Leticia N.3; LIMA, Raissa A. Alves de3; ABE, Aline Tancler Stipp2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: As espécies de Candida são um dos principais agentes etiológicos de
infecções oportunistas em humanos, no entanto, o tratamento das cadidemias têm
sido dificultado por conta dos diversos mecanismos de resistência que esses fungos
apresentam. O gene ERG11 é um dos grandes responsáveis por conferir resistência
a essa espécie, uma vez que sua superexpressão favorece a produção de grandes
quantidades de lanosterol 14-α-desmetilase, enzima precursora de ergosterol, o qual
confere integridade à membrana celular desses parasitas, dificultando a ação dos
azólicos. O presente estudo tem como objetivo avaliar a presença desse gene em
amostras de Candida tropicalis, além de verificar o perfil de susceptibilidade frente
ao fluconazol, a fim de contribuir para a prevenção do fenômeno de resistência,
portanto, e facilitar o tratamento das infecções ocasionadas pela Candida tropicalis.
Objetivo: O presente estudo tinha como objetivo verificar o perfil de suscetibilidade
frente ao antifúngico fluconazol em isolados clínicos de Candida tropicalis, além de
avaliar a presença de mutação e do gene ERG11 nas amostras.
Materiais e método: Os isolados foram obtidos de amostras de candidemia de um hospital
terciário da cidade de Londrina, os quais tiveram sua sensibilidade ao Fluconazol
testada previamente conforme o método do CLSI. O inóculo foi preparado em
Sabouraud dextrose. O ajuste celular foi realizado com a utilização de câmera de
Neubauer. O DNA foi extraído utilizando o método de lise alcalina modificado. O
gene ERG11 foi amplificado por PCR, utilizando primers após realizado BLAST. Os
fragmentos de PCR foi analisado preliminarmente por eletroforese em gel de
agarose a 1,0%, e visualizado sob foco ultravioleta em Transilluminator.
Resultados: Foi possível observar que a espécie Candida tropicalis possui
resistência extrínseca dose dependente ao Fluconazol, ou seja, oriunda de
exposição prévia ao medicamento. Esse fenômeno fora evidenciado conforme o
aumento dos valores das MICs, uma que as amostras foram classificadas como
sensíveis dependentes para valores iguais a 16 e 32 μg/mL e resistentes para
valores iguais a 64 μg/mL. Além disso, o estudo revelou que o gene ERG11 fora
encontrado naqueles isolados de maiores valores de MIC, nos quais foram
designados como resistentes, e ausentes naquelas com menores valores de MIC,
sendo possível relacionar o fenômeno de resistência com a expressão do gene
encontrado.
Considerações finais: É possível concluir que a resistência extrínseca
da espécie Candida tropicalis tem grande relação com elevadas doses de
Fluconazol, assim como com a expressão do gene ERG11. Dessa forma, a
adequação das doses desse medicamento seria de grande importância para que
esse fenômeno seja evitado, controlando mais facilmente o tratamento das
candidemias.
Palavras chave: Candida tropicalis. Candidemia. Gene ERG11. Polimorfismo. Resistência a azólicos.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | DUARTE, Sofia Cavalim1; CAVALARI, Caroline Maria de Andrade3; MACEDO, Renata Ernlund Freitas de2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Probióticos são microrganismos vivos que beneficiam a saúde gastrointestinal por diferentes modos de ação, sendo administrados por suplementos alimentares ou pela ingestão de certos alimentos fermentados. A bactéria C. maltaromaticum, encontrada em laticínios e na microbiota de peixes e mamíferos, apresenta síntese de bacteriocinas e habilidade de sobrevivência em condições de temperatura e pH não favoráveis a certas bactérias patógenas, revelando-se um potencial agente probiótico.
Objetivo: O objetivo deste projeto foi avaliar o uso de Carnobacterium como cultura probiótica contra a invasão e aderência de patógenos alimentares (L. monocytogenes, E. coli e S. Typhimurium) em células Caco-2, comparando-a com o controle probiótico comercial, Lactobacillus reuteri.
Materiais e método: Células Caco-2 foram cultivadas em meio DMEM suplementado com 10% de soro bovino fetal até que formassem uma monocamada polarizada com morfologia característica de enterócitos com junções celulares, com 80-100% de confluência. A concentração das células no tempo inicial foi medida utilizando uma câmara de Neubauer e posteriormente foram inoculadas e incubadas em placas com seis poços até confluência. As cepas de C. maltaromaticum e L. reuteri foram cultivadas e contadas por plaqueamento superficial e por profundidade, respectivamente. As bactérias foram inoculadas para a concentração de 10^6 cfu/mL por poço e depois incubadas. As células aderidas foram removidas, ressuspendidas e inoculadas em meios de crescimento microbiano para posterior contagem.
Resultados: As células Caco-2 apresentaram crescimento regular e formação de monocamada polarizada. Entretanto, os frascos de cultivo celular apresentaram contaminação microbiana indesejável, levando a inconsistências na contagem bacteriana e de células Caco-2 e inviabilizando os dados de aderência bacteriana. Devido ao isolamento social causado pela COVID 19 não houve tempo hábil para a adequação laboratorial da técnica analítica durante a vigência deste plano de trabalho.
Considerações finais: Os protocolos devem ser adequados às condições laboratoriais, com o intuito de evitar futuras contaminações, sendo necessária a padronização das técnicas para futuros experimentos.
Palavras chave: Probióticos. Carnobacterium maltaromaticum. patógenos alimentares. células Caco-2.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | SILVA, Eduarda Aparecida Fernandes da1; LEITE, Julio Cesar de Moura2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Répteis têm se mostrado excelentes organismos modelo para estudos relacionados a diferentes aspectos da variação morfológica, originando assim pesquisas com ênfase na biologia comparada, ontogenia e na variação fenotípica. No entanto, a maioria dos grupos apresenta grandes problemas de cunho sistemático e taxonômico, bem como limitação de informações sobre aspectos biológicos, especialmente crescimento e desenvolvimento. O estudo da morfologia exerce papel preponderante no esclarecimento de dúvidas em relação a esses temas. Estudos que utilizam a morfometria para a compreensão de adaptações morfológicas em um contexto evolutivo vêm crescendo nos últimos anos em todos os grupos de organismos.
Objetivo: Os objetivos do presente trabalho foram a) realizar um levantamento bibliográfico, a fim de analisar quais grupos de répteis têm tido destaque em estudos morfométricos; e b) apresentar aspectos utilizados no estudo morfológico de répteis, com ênfase no uso da morfometria geométrica, de maneira a avaliar o seu papel como ferramenta de estudo na compreensão dos fatores envolvidos na variação morfológica desses animais.
Materiais e método: Com o auxílio das bases acadêmicas SciELo, CAPES, Google Scholar e livros, foi realizado um levantamento bibliográfico, objetivando a obtenção de informações disponíveis acerca do assunto tratado no referido trabalho. Para tanto, foram utilizados unitermos em inglês e português.
Resultados: Testudines foi a ordem mais presente durante a pesquisa, com 50% seguida por Squamata com 33,3%. Estudos sobre variações no crânio utilizando a morfometria estiveram presentes em todos grupos de répteis, isto se devendo ao fato da morfologia craniana dos animais ser um resultado da interação entre a expressão gênica e a ação ambiental, consistindo assim em um parâmetro essencial em avaliações populacionais. Outro tema abordado foi a interferência ambiental na morfologia. Esta modificação é induzida pela genética e fatores ambientais, os quais podem modificar o processo de crescimento do organismo e pode ser um fator crucial para a sobrevivência da espécie. Além de ser um fator chave para a especiação. Apesar das vantagens explícitas neste trabalho sobre o uso da morfometria para interpretar a diferenciação e a divergência morfológica a nível específico, denota-se a necessidade de cuidados na aplicação desses métodos. A determinação de variáveis para serem analisadas, e a transformação destas variáveis em estimativas de diferenças na forma dos organismos são empecilhos da morfometria. Ao se ter conhecimento disso, podem ser evitados erros que podem comprometer toda a pesquisa.
Considerações finais: Estudos de morfometria, especialmente de métodos relacionados à morfometria geométrica, podem ser considerados como uma excelente ferramenta para a compreensão das variações morfológicas de forma mais abrangente, incluindo a avaliação dos fatores externos relacionados a essas mudanças.
Palavras chave: Répteis. Morfometria. Morfologia. Métodos.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | CARMO, Leticia Arianne Panini do1; MALAQUIAS, Prof. Dr. Mineia A. S.3; CASTRO, Dr. Eduardo de3; NORONHA, Lucia de2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Glioma is the most prevalent malignant brain tumor in all age groups and has a mortality rate of up to 70%. Treatment consists of resection of the tumor, but it is a tumor that is very refractory to treatment, leading to a low survival rate for patients. Among the tumor biomarkers, Parkin, TCTP, KI67 and P53 stand out, with Parkin and P53 being tumor suppressor proteins and TCTP and KI67 promoter proteins.
Objetivo: Evaluate the expression of biomarkers in pediatric gliomas.
Materiais e método: This is a retrospective, descriptive cross-sectional study (N = 104), reviewed and approved by the Ethics and Research Committee of Hospital Pequeno Príncipe, in Curitiba, Paraná (Registration number: 1,787,170). The pediatric glioma tissues, collected between 2003 and 2015, were blocked, stained and submitted to histological cuts, after immunohistochemical research of Parkin, TCTP, P53 and KI67 was performed. The images of the slides were obtained by the AxioScan® digitizer, which resulted in several images of each slide. The images were analyzed and the quantification of the expression of each biomarker was quantified.
Resultados: Parkin expression in high-grade astrocytomas is reduced in comparison with low-grade astrocytomas in the morphometric (p = 0.011) and morphological (p = 0.036) analyzes. The tissue expression of P53 demonstrated the opposite behavior. High-grade tumors showed increased immunohistochemical expression (p <0.001). The percentage of KI67 immunostaining also increased in high-grade astrocytomas (p <0.001). Regarding the morphology of TCTP expression, a diffuse and strong intensity distribution was observed, regardless of the degree of the tumor.
Considerações finais: TCTP, KI67, Parkin and P53, have important relevance in the pathogenesis of pediatric gliomas, however new studies must be carried out to better understand the mechanisms for each biomarker liable.
Palavras chave: GLIOMA. TCTP. P53. KI67. PARKIN.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | MARINI, Emily Scaranello1; NORONHA, Lucia de3; PESSERL, Maria Helena3; MALAQUIAS, Mineia Alessandra Scaranello2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: Microcephaly is an anomaly found in neonates with Congenital Zika Syndrome. The Blood-brain Barrier (BBB), an essential component of protection of the Central Nervous System (CNS), presents selective permeability, dependent of multiprotein complexes, such as occludins.
Objetivo: To compare the tissue expression of the occludin protein in the BBB of neonates with cerebral malformation (ZIKV group) to neonates that did not present brain damage (control group).
Materiais e método: This is a cross-sectional, descriptive retrospective study. The study group was composed by six stillborns (n = 6) who were infected with ZIKV at different stages of pregnancy. All of them had Congenital Zika Syndrome and died in the first hours of life. Serological tests were performed that showed negative results for TORCHS or HIV viruses. The control group was composed by six full-term stillborns (n = 6) who died from respiratory stress and lung injury. They had no brain injury and, therefore, their BBB is considered physically healthy. They also showed negative results for the serological tests applied. The samples were stained with HE and subjected to immunohistochemistry with the anti-ocludin antibody. Morphometric analysis to assess the area was performed with the Image Pro Plus® 4 program. Statistical analysis was performed with the IBM SPSS Statistics v.20.0 computer program. The results were described as average, median, minimum, maximum and standard deviation. For categorical variables, percentages were presented. In all analyzes, the level of significance adopted was 5%.
Resultados: Comparing the percentages obtained from the samples between the ZIKV and control groups, a significant increase in protein was found in the ZIKV group (p = 0.009).
Considerações finais: The increased tissue expression of occludin in the ZIKV samples observed in this study strengthens the hypothesis of using the ZIKV transcitosis mechanism to overcome the BBB, so that investigating the other proteins in the occlusion junctions of the BBB endothelium may be the key in finding the ZIKV path to the brain.
Palavras chave: ZIKV. Occludin. Microcephaly. Stillborns. Blood-Brain Brarrier
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador
| Autor(es) | ZENI, Rafaela Chiuco1; NORONHA, Supervisão da Dra. Lucia de3; NAGASHIMA, Seigo3; PAULA, Caroline Busatta Vaz de3; MARTINS, Ana Paula Camargo3; NETO, Plínio Cézar3; CARMO, Leticia Arianne Panini do3; MARINI, Emily Scaranello3; MALAQUIAS, Mineia Alessandra Scaranello2 |
|---|---|
| Resumo | |
Introdução: O Zika vírus (ZIKV) é um RNA vírus da família flaviviridae. Após a Copa do Mundo, em 2014, ele se tornou destaque pela quantidade de aparecimento de casos da doença, bem como, pelo nascimento de bebês com microcefalia oriundos de mães que tiveram ZIKV durante a gravidez. A microcefalia acontece devido a uma falha da barreira hematoencefálica (BHE), em que o vírus consegue ultrapassar esta estrutura e gerar o transtorno no cérebro do feto. Para garantir a proteção do Sistema Nervoso Central (SNC), a BHE conta com junções de oclusão constituídas por claudinas e ocludinas.
Objetivo: Analisar a expressão tecidual das proteínas claudinas 1, 3 e 5 na BHE de neonatos com malformação cerebral.
Materiais e método: Trata-se de um estudo transversal descritivo retrospectivo. O grupo de estudo foi composto por seis neonatos (n=6) que foram infectados pelo ZIKV em diferentes fases da gestação. Todos apresentaram a Síndrome do Zika Congênito e foram a óbito nas primeiras horas de vida. Foram realizados testes sorológicos que demonstraram negatividade para vírus TORCHS ou HIV. O grupo controle foi composto por oito neonatos a termo (n=8) que foram a óbito por estresse respiratório e lesão pulmonar. Não apresentavam lesão cerebral e, portanto, sua BHE é considerada fisicamente íntegra. Também apresentaram negatividade para os testes sorológicos aplicados. Para determinar a expressão das proteínas Claudinas 1, 3 e 5 foram utilizados anticorpos monoclonais anti-claudinas 1, 3 e 5 por meio da técnica de imunohistoquímica (IHC). A análise morfométrica para avaliar a área foi realizada com o programa Image Pro Plus® 4. A análise estatística foi realizada com o programa computacional IBM SPSS Statistics v.20.0. Os resultados foram descritos por média, desvio padrão, mediana, mínimo e máximo. Para variáveis categóricas foram apresentados os percentuais. Em todas as análises, o nível de significância adotado foi de 5%.
Resultados: Comparando os percentuais obtidos das amostras entre os grupos ZIKV e controle, encontrou-se um aumento significativo da proteína claudina 5 no grupo ZIKV (p=0,048). Enquanto que nas claudinas 1 e 3 a expressão de ambas se mostrou semelhante tanto no grupo controle quanto no ZIKV, não havendo significância estatística confirmada (claudina 1: p= 0,950; claudina 3: p= 0,937).
Considerações finais: O aumento da expressão tecidual das claudinas nas amostras ZIKV observadas neste estudo, fortalece a hipótese de utilização do mecanismo de transcitose pelo ZIKV para ultrapassar a BHE, de forma que, investigar as demais proteínas das junções de oclusão, bem como das junções aderentes do endotélio da BHE, possa ser a chave na descoberta do caminho do ZIKV até o cérebro.
Palavras chave: ZIKV; barreira hematoencefálica; microcefalia; claudina; Síndrome do Zika Congênito.
Legendas:
1. Estudante
2. Orientador
3. Colaborador